紫外分光光度計(jì)的吸光度及雜散光如何校正？

紫外分光光度計(jì)的吸光度及雜散光如何校正？

吸光度的校正方法：校正吸光度常用一很純物質(zhì)一定濃度的溶液為標(biāo)準(zhǔn)，且此溶液的吸光度系數(shù)經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)室核對(duì)，為了使標(biāo)準(zhǔn)液吸光度不受測定波長的微移動(dòng)而有改變，常選擇具有較平滑吸收高峰的物質(zhì)，同時(shí)要求溶液穩(wěn)定，且在相當(dāng)?shù)牟ㄩL范圍內(nèi)吸收度的改變符合Beer-Lambert定律，常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是*常用的標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液在紫外區(qū)和可見區(qū)均適用。

雜散光的校正方法：小量的雜散光往往會(huì)引起較大的測量誤差，它的校正可用一個(gè)能完全吸收某一波長單色光，且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個(gè)溶液所表現(xiàn)的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶，亦可用Beer-Lambert定律來檢查，但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現(xiàn)的透射比可得出近似的雜散光百分?jǐn)?shù)。若所含雜散光大于0.1%，應(yīng)設(shè)法減低，或?qū)y得的吸收光度進(jìn)行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比，因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計(jì)算而得。此外，還可用一個(gè)適當(dāng)?shù)臑V光片，該濾光片在測定波長范圍內(nèi)完全透光，但吸收此范圍外的光波，由此來消除雜散光。